CBD Tests et breeding 2.0

Le labo de Dinafem a été fondé il y a 4 ans. Il a été lancé en octobre 2012 par une équipe de spécialistes qui travaille en collaboration avec Renovatio and Ai Laket. A l'origine, le local du labo avait été conçu pour un projet de réduction des risques qui consistait à analyser des échantillons fournis par des clubs – auxquels les informations sur les teneurs en cannabinoïdes étaient renvoyées. Dinafem a activement soutenu ce projet avant d'y développer ses propres tests pour créer des autos et étudier leurs propres variétés.

Ils sont repartis de zéro parce que les méthodes d'analyses appliquées auparavant étaient incorrectes. Ils ont dû concevoir et valider leur propre méthode. Les exigences ont augmenté depuis l'époque des premiers tests et ils ont réussi à obtenir des tests dont le degré de précision est fiable. Comme me l'a expliqué le Dr. Ananda: "Quand nous avons reçu de nouveaux instruments de test; le software intégré reste comme aveugle, ce qui signifie qu'il faut lui ajouter notre propre méthode par un processus validé."

Avantages des tests

Cela a rapidement démontré que le breeding et la sélection aidés par des tests de chromatographie derniers cris ont fortement amélioré les génétiques. Par exemple, en 3 générations, on a vu les autos qui avant avaient une teneur en THC de 10% passer à 15%, voire plus. Quand ces résultats ont été confirmés, Dinafem a décidé qu'il leur fallait plus d'équipements pour pouvoir augmenter le nombre et la fréquence de leurs propres tests. Ils ont donc lancer ce labo en septembre 2014 et en janvier 2015, il était déjà complet.

Grâce aux expériences menées avec les instruments précédents, il a été plus facile pour le Dr. Ananda de préparer et valider cette méthode même avec le nouveau matériel: "Il faut toujours mener plusieurs tests jusqu'à aboutir au niveau de précision désiré." Aujourd'hui, il considère que ces tests sont très fiables pour les objectifs définis et les sélections réalisées jusqu'à présents n'ont jamais produit des résultats qui n'étaient pas attendus. Au départ, ils se sont lancés avec le breeding d'auto et développé la Bubba Kush Autofleurissante et l'OG Kush Autofleurissante. Les résultats obtenus avec ces lignées n'ont montré aucun faille; dès les premiers croisements, elles ont développé des phénotypes intéressants qui ont invariablement montré leurs qualités – par ex, il a été démontré lors de la dernière Expogrow cup que l'OG Kush Autofleurissante était la plus constante en terme de puissance avec 20% de puissance en plus selon un test mené par un laboratoire indépendant.

Comme l'a fait remarqué le Dr. Ananda: "Tester les plantes de manière régulière et en permanence contribue fortement à l'amélioration d'une lignée car cela permet d'en identifier les meilleurs spécimens." En plus de donner les taux de cannabinoïdes, les tests contribuent également à une meilleure compréhension des génétiques. Par exemple, la distribution des chémotypes d'une variétés données aide à identifier le matériel d'origine, F1, F2 ou F3. Cela met également en lumière l'importance du choix de la méthode de culture car le cultivateur peut obtenir différents taux de cannabinoïdes avec une même plante. Cela peut, par exemple, démontrer que, dans des conditions climatiques contrôlées avec une lumière intense, un cultivateur peut obtenir une récolte abondante et de plus hauts niveaux de résine et de cannabinoïdes. De même que les taux de CBD peuvent augmenter ou diminuer dans une certaine rangée en fonction de l'habilité d'un cultivateur.

La chromatographie pour aider le breeding CBD

Au début, c'était centré sur le THC. C'était très intéressant pour le CBD mais atteignait rarement des niveaux appréciables. Au cour d'analyses de routine, des taux significatifs de CBD ont été découverts dans une lignée de génétiques américaines avec laquelle ils travaillaient et à partir de laquelle ils ont créé la Purple Orange CBD. Bien sûr, ils savaient très bien qu'en plus du THC et du CBD, d'autres cannabinoïdes devaient être pris en considération et ils étaient préparés à trouver des taux inhabituels. Leur but a toujours été d'améliorer le pôle génétique global. Cela leur a surtout montré qu'au fil des ans, ils avaient fait des découvertes importantes et que dans un avenir proche beaucoup d'autres plantes spéciales seront mises sur le marché. L'année prochaine sera également caractérisée par des recherches sur le "suivi des effets" qui consiste à étudier l'impact de combinaisons de cannabinoïdes (terpènes et autres composants d'une plante) sur l'effet final.

Il est aujourd'hui largement connu que les résultats obtenus avec des extractions directes de plantes sont plus riches que lorsqu'on n'utilise qu'un seul cannabinoïde. Une fois totalement confiants dans les capacités des tests, ils ont rapidement lancé le projet CBD qui avait besoin des meilleurs instruments possibles car ils allaient être utilisés intensivement plusieurs mois d'affilées. Ils ont passé deux semaines ininterrompues à faire des tests pour la sélection des premiers parents au sein d'un lot massif. Les échantillons étaient préparés en journée que les machines analysaient la nuit par un système de traitement des échantillons automatisés. De cette manière, ils ont vu que malgré les limites de l'ensemble des instruments, ils ont suffi pour rencontrer les exigences de Dinafem. Comme le dit Dr. Kush: "Certaines banques de semences utilisent l'OG Kush Autofleurissante de Dinafem pour produire des autos de qualité.

Ils profitent donc aussi de notre travail. Mais quand il s'agit de CBD, la route devant nous est encore longue et il n'y a pas de raccourcis. L'excellence ne peut être atteinte qu'au travers de tests et un travail laborieux, génération après génération." Avant de lancer le projet, ils connaissaient les bases théoriques du breeding – en particulier du breeding CBD. Mais ils ont franchi plusieurs étapes, sont passés de la théorie à la pratique et démontré, grâce à des instruments fiables comme le chromatographe, qu'ils avaient atteint les résultats recherchés. Comme ils n'ont travaillé qu'avec les chémotypes nécessaires pour le projet, ils ont pu faire plusieurs sélections avec la possibilité d'écarter un grand nombre d'individus pour n'utiliser que les meilleurs. Leur première tâche étaient de séparer les chémotypes des plantes à dominance CBD, avec des concentrations variables d'une plante à l'autre. Durant ce processus, ils ont sélectionné les plantes avec les plus hautes teneurs en cannabinoïdes.

Dans la pratique courante, les tests ne sont évidemment qu'une partie de l'histoire; occasionnellement, un test de labo peut trouver des chémotypes qui sont apparemment très semblables mais développent finalement des différences quand ils sont cultivés. Pour cette raison, les données analytiques sont étroitement liées à des facteurs humains; le travail des experts du breeding est ce qui donne la touche finale spéciale de Dinafem. Après avoir analysé des populations entières, l'étape suivante est de tracer des graphiques montrant les distributions. C'est particulièrement important pour commencer à travailler avec du matériel génétique concret et vérifier si les plantes se comportent de la manière voulue. Généralement, cette cartographie est également utilisée pour écarter tous les groupes de plantes qui ne sont pas intéressants pour le projet. Actuellement, cette étape est devenue superflue car l'équipe de Dinafem connait parfaitement le matériel génétique sur lequel elle travaille et sait à l'avance ce qu'il faut dans un croisement.

Elle arrive donc directement au résultat désiré. En ayant acquis de l'expérience grâce aux diverses phases de tests, la banque a fait savoir qu'une plante ne peut pas être entièrement jugée tant qu'elle n'avait pas mûri mais tous les phénotypes ne mûrissent pas dans le même laps de temps, ce qui rend certaines comparaison incorrectes. De fait, le meilleur individu d'un groupe peut le 30ème jour paraitre comme une jeune pousse unique et après 60 jours, il ne sera pas nécessairement le meilleur du même groupe. Ils nous ont également parlé de leurs expériences avec le test des taux de diverses extractions – par ex., pour vérifier les effets sur plusieurs patients afin de les associer avec chaque taux. Ils ont également analysé divers extraits CBD faits à partir d'un chanvre industriel disponible sur le marché et découvert que certains étaient des produits bas de gamme avec des taux beaucoup moins élevés que ceux mentionnés sur l'étiquette.

Echantillonnage, test et sélection

Après mes discussions dans le labo avec le Dr. Ananda, je suis allé – avec lui, Dr. Kush et Dr. O3 – visiter une de leur aire de sélection des plantes. Là, j'ai pu les voir en pleine action en train de faire des sélections soigneuses parmi 250 femelles et 100 mâles. Premièrement, ils ont supprimé les hermaphrodites pour ne pas retrouver les caractéristiques intersexes dans leur pôle génétique. La plupart des plantes CBD avaient des traits Sativas mais, comme Dinafem est toujours à la recherche de nouveautés, ils ont fini par privilégier les traits Indicas et sélectionné celles qui avaient de grandes feuilles, une taille moyenne et un goût délicieux, et supprimé les plantes qui avaient tendance à devenir particulièrement grandes – ce qui peut sembler contre-productif.

Comme l'a fait remarquer le Dr. Ananda : "Afin d'atteindre des résultats spécifiques, il est crucial de suivre de bonnes pratiques dès le début, dès le moment où vous prenez des échantillons et tout le long des processus de test." Durant ma visite, j'ai clairement compris ce qu'il voulait dire – avant de commencer, ils mettent une salopette blanche et des gants de latex. Ils ont commencé par sélectionner les plantes les plus intéressantes et les ont numérotées; ensuite, ils ont pris des échantillons sans toucher les fleurs et les ont directement mis dans des bocaux qui ont également été numérotés sur les parois et sur le couvercle pour éviter toute erreur.

Le test est l'étape suivante. Ici, le Dr. Ananda suit une méthode spécifique décrite dans un autre article. Cette méthode a depuis lors été améliorée par l'utilisation de températures plus faibles et de moins de matériels (pour éviter de salir le chromatographe). Pour résumé cette longue histoire, le processus consiste à sécher l'échantillon à 40°, le peser, le dissoudre par ultrasons, le centrifuger, le passer dans un four pour la décarboxylation, le diluer dans de l'éthanol et le mettre dans le chromatographe. Chaque analyse est répétée plusieurs fois pour exclure toute erreur. Pour terminer, le Dr. Ananda interprète les résultats avec un PC et prépare les rapports pour chaque groupe de plantes.

Parent à dominance CBD

Nous avons également visité la zone ont sont gardées les meilleures plantes mères de variétés à dominance CBD avec lesquelles sont créés les hybrides CBD. Au lieu d'utiliser la même plante à dominance CBD pour différentes variétés, ce qui les homogénéiserait, Dinafem est l'une des rares banques à utiliser une large variété de parents à dominance CBD, tant mâles que femelles, afin de travailler sur chaque hybride indépendamment.

Conclusions

Les variétés CBD sont cultivées comme une forme d'artisanat. Dans le passé, les breeders se sont basés sur un mélange d'intuition et de chance. A cette époque, il y avait très peu de labos qui auraient pu les assister. Aujourd'hui, l'élément humain est compléter par des tests extensifs. Ce nouveau type de breeding 2.0 évolue maintenant vers l'excellence de plus en plus rapidement et les cultivateurs vont de plus en plus bénéficier d'une grande variété d'options – toutes différents et entièrement stables. Text: H. Madera