Analítica y crianza 2.0 del CBD

Visitamos Dinafem para hablar con el Dr. Ananda de cómo utilizan las analíticas para desarrollar sus variedades CBD. El área de analíticas de Dinafem acaba de cumplir 4 años. Empezaron en octubre del 2012, poniendo en marcha un equipo en colaboración con Renovatio y Ai Laket. Este espacio estaba destinado a la reducción de riesgos, analizando muestras de los clubs e informándoles de su contenido en cannabinoides. En Dinafem participaron para apoyar el proyecto y de paso emplearon ese instrumental para la crianza de las autoflorecientes y para conocer a fondo sus variedades. Partieron de cero porque el método de análisis no era correcto, así que tuvieron que diseñar y validar su propio sistema. Desde las primeras pruebas han subido mucho el nivel de exigencia, hasta llegar a una precisión de análisis que les resulta fiable. Según nos explica el Dr. Ananda, “cuando llegan los instrumentos el programa que incluyen está ciego, tienes que introducir al ordenador tu propio método validado”.

Ventajas de las analíticas

Pronto comprueban que la crianza y selección asistidas por cromatografía da sus frutos de mejora, por ejemplo, en 3 generaciones ven como autoflorecientes que estaban en un 10% de THC suben a un 15% o más. Al comprobar estos resultados en Dinafem deciden que necesitan una herramienta más personal, para realizar mayores cantidades de análisis y con mayor frecuencia. Empezaron a crear este espacio en septiembre del 2014 y en enero del 2015 ya estaba finalizado. Como el Dr. Ananda ya había cogido experiencia con la primera equipación, le resultó mucho más fácil preparar y validar el método, aunque al ser material nuevo “siempre se necesita ensayar un poco hasta alcanzar el nivel de precisión deseado”. En la actualidad consideran las analíticas muy fiables para sus fines, pues nunca se les ha colado en una selección algo que no esperaban. Al principio siguen con la crianza de autos y realizan el desarrollo de la Bubba Kush Autoflowering y la OG Kush Autoflowering, con estas líneas van a tiro fijo, pues desde el cruce inicial localizaron todos los fenotipos interesantes. Este trabajo también rindió sus frutos, por ejemplo, en la última copa de la Expogrow, la OG Kush Autoflowering fue la más potente, superando niveles del 20%, según un laboratorio independiente. Tal como explica el Dr. Ananda: “hacer análisis con consistencia y continuidad ayuda mucho en la mejora de las líneas, ya que se localizan con facilidad los mejores individuos”. Además de informar sobre los niveles de cannabinoides, la analítica también sirve para profundizar en el conocimiento de las genéticas, por ejemplo, hacer la distribución de los quimiotipos que presenta una variedad ayuda a determinar el estado del material de base, si es una F1, una F2 o una F3. Otro aspecto en que han profundizado mucho es la importancia del método de cultivo y el cultivador, pues de la misma planta se pueden sacar diferentes niveles de cannabinoides. Así, han comprobado que, en un entorno climático controlado, y con mayor cantidad de luz, se obtiene más producción, más resina y mayor nivel de cannabinoides. También, según la mano del cultivador, los niveles de CBD pueden aumentar o disminuir dentro de un rango.

Crianza del CBD con cromatografía

Al principio estaban centrados en el THC, por el CBD había mucho interés, pero se veía raramente. Con los análisis rutinarios descubrieron CBD en una de las líneas genéticas americanas con las que trabajan, de donde crean la Purple Orange CBD. Tienen claro que más allá de THC y CBD hay otros cannabinoides, por lo que están preparados para detectarlos si se presentaran en un grado inusual, pues quieren contribuir a mejorar la piscina genética global. Según comentan, durante los últimos años se han realizado bastantes descubrimientos de interés, pero en un futuro cercano aparecerán muchas plantas especiales. También se profundizará en la investigación sobre el efecto séquito que estudia la influencia en el efecto final de la combinación de cannabinoides, terpenos y otros componentes de la planta, pues se sabe que el resultado de los extractos directos de la planta es mucho más completo que usar un solo cannabinoide. Cuando tenían total confianza en su capacidad de análisis empiezan a fondo con el proyecto del CBD, donde se requiere utilizar la equipación a tope, ya que hacen uso intensivo durante meses. Llegan a estar dos semanas enteras analizando sin parar durante la selección de los primeros parentales, realizada sobre un cultivo masivo, de día se preparaban las muestras y de noche la maquina analizaba, alimentada por un procesador de muestras automatizado. Con esto pudieron verificar que, aunque el set de instrumentos es pequeño, resulta eficiente para cubrir las necesidades de Dinafem. Según nos explica el Dr. Kush “hay bancos de semillas que utilizan la OG Kush Autoflowering de Dinafem para hacer autoflorecientes de buena calidad, aprovechando el trabajo que hemos desarrollado, pero en el CBD si quieres hacer un buen trabajo hay un camino largo y sin atajos, la excelencia solo se consigue con analíticas y un trabajo de varias generaciones”. Antes de empezar el proyecto conocían la base teórica de la crianza y especialmente la crianza con CBD. Según se desarrollaron los diferentes pasos, pasaron de la teoría a la práctica, al comprobar con un revelador fiable como el cromatógrafo que llegaban los resultados esperados. En este proyecto, como trabajan solo con los quimiotipos deseados se facilitan las selecciones amplias, al poder descartar un gran número de individuos, por lo que se favorece mucho encontrar los mejores. En primer lugar, separan los quimiotipos de CBD dominante, dentro de estos hay concentraciones variables, por lo que eligen las plantas con mayores niveles de cannabinoides. Por supuesto los análisis son solo una parte, a veces en el laboratorio se presentan quimiotipos que parecen muy iguales, pero al volver al cultivo se ven claras diferencias. Por eso es importante emplear los datos de las analíticas junto con el factor humano, de criadores avezados, así llevan a la selección final el toque Dinafem. Tras realizar la analítica de poblaciones completas hacen gráficas donde ven como se distribuyen, sobre todo cuando empiezan a trabajar con un material genético concreto, para comprobar si las plantas se comportan como ellos esperan. Este mapeado también sirve para descartar el conjunto de plantas sin interés para el proyecto. Ahora es un paso prescindible, pues conocen a fondo el material genético con el que trabajan, por lo que saben de antemano que ocurrirá en los cruces y van directamente al resultado buscado. Al realizar analíticas en distintas fases, constatan que no se puede juzgar totalmente una planta hasta que termina, pues no todos los fenotipos maduran a la vez, por lo que la comparativa es inexacta, de esta forma la mejor de un grupo a los 30 días puede ser solo más temprana, mientras que la mejor del mismo grupo a los 60 días es otra. Por otro lado, analizan las ratios de diferentes extracciones y ven como les sientan a distintos pacientes, para conocer qué tipo de efectos están asociados a cada ratio. También han analizado varias de las extracciones de CBD desde cáñamo industrial que existen en el mercado, descubriendo que algunas son de baja calidad y contenidos muy inferiores a lo que asegura el etiquetado.

Toma de muestras, analítica y selección

Tras hablar en el laboratorio con el Dr. Ananda, le acompañé junto al Dr. Kush y el Dr. O3 a una de las zonas de selección de plantas que tienen. Allí pude verles en acción, realizando el descarte entre 250 hembras y 100 machos. En primer lugar, eliminan las plantas hermafroditas, para limpiar la piscina genética de rasgos intersexuales. Como la mayoría de las plantas CBD muestran rasgos de Sativa, en Dinafem buscan la novedad al llevarlas al lado Indica, con hojas grandes, tamaño mediano y sabores deliciosos, por ejemplo, desechan plantas por tener un porte demasiado alto, lo que a veces les resulta contraintuitivo. Según comenta el Dr. Ananda “para tener resultados precisos es fundamental seguir las buenas prácticas desde el primer momento cuando tomas las muestras, así como en todo el proceso de laboratorio”. En la visita quedó claro a que se refiere, antes de empezar se visten con un mono blanco y guantes de latex. Primero seleccionan las plantas más interesantes y las numeran, a continuación, viene la toma de muestras, efectuada sin tocar las flores, introduciéndolas directamente a un bote numerado, con tapa también numerada, de forma que disminuyan las posibilidades de error. Después llega el trabajo de analítica, donde El Dr. Ananda sigue un método que ya detallamos en el artículo “Día de polinización”, aunque lo ha ido afinando y trabaja a temperaturas más bajas, además de emplear menos material para no ensuciar el cromatógrafo. De forma resumida el proceso es desecar la muestra a 40º, pesado, dilución por ultrasonidos, centrifugado, descarboxilación en horno, dilución en etanol e introducción en la columna cromatográfica. Cada análisis se repite varias veces para descartar errores. Por último, desde el ordenador, el Dr. Ananda interpreta los datos y prepara los informes de cada grupo de población.

Parentales CBD dominantes

También visitamos el área de madres, donde guardan una copia de los mejores parentales CBD dominantes, con los que elaboran sus híbridos CBD. En vez de usar la misma CBD dominante en distintas variedades, lo que las homogeneiza, Dinafem es uno de los escasos bancos que dispone de un amplio grupo de distintos parentales CBD dominantes, tanto machos, como hembras, por lo que pueden trabajar cada híbrido de forma independiente. Aunque siguen con la mejora y el trabajo sobre cada línea, sin duda esta variedad de parentales coloca a Dinafem en los primeros puestos de la crianza del CBD.

Conclusiones

Las variedades con CBD empezaron como un trabajo totalmente artesanal, en el que los criadores se basaban en una mezcla de intuición y suerte, en aquellos años casi no había laboratorios que pudieran ayudarles. En la actualidad el factor humano se complementa con abundantes analíticas, esta crianza 2.0 avanza hacia la excelencia con mayor rapidez, por lo que cada vez llegarán a los cultivadores más variedad de opciones diferenciadas y totalmente estabilizadas. Text: H. Madera